大腸杆菌宿主蛋白酶聯檢測試劑盒是用來定量分析以大腸杆菌為(wei) 表達細胞 的生物藥物中宿主蛋白雜質的試劑盒。首先，用不同濃度的大腸杆菌標準蛋白製 作一條標準曲線，然後再根據標準曲線來分析生物藥物中宿主細胞殘留蛋白的含 量。具體(ti) 方法為(wei) ：先將大腸杆菌標準蛋白或者待測樣品適當稀釋後加入已包被好 抗大腸杆菌宿主蛋白抗體(ti) 的96孔平板中。經過1.5小時的保溫，宿主細胞蛋白與(yu) 已經固定在平板上的抗體(ti) 結合形成抗原－抗體(ti) 複合物。此複合物被隨後加入的生 物素標記的抗大腸杆菌宿主蛋白的抗體(ti) 結合並進一步形成更高級的複合物，反應 45分鍾後洗去未結合的物質。再加入鏈黴親(qin) 合素-辣根過氧化物酶複合物，靜置 30分鍾。因鏈黴親(qin) 合素可以與(yu) 任何帶生物素標記的抗體(ti) 相結合，從(cong) 而使鏈黴親(qin) 合 素-辣根過氧化物酶複合物連接到平板上。接下來衝(chong) 洗掉未結合的物質，加入TMB 底物。固相上的酶催化底物產(chan) 生顏色反應，待顏色反應一段時間後，終止反應。 用酶標儀(yi) 在450 nm波長下測定其結果，此結果能間接地反應結合到平板上的的宿 主細胞蛋白數量的多少。根據大腸杆菌宿主蛋白標準曲定量分析生物藥物中宿主 細胞殘留蛋白的含量。