Ovation人類FFPE RNA-Seq多重文庫構建試劑盒使用從(cong) 人類組織或細胞係獲得的納克級總RNA,為(wei) 鏈特異性RNA-Seq文庫構建提供了端到端的解決(jue) 方案。該工作流程同樣適用於(yu) 新鮮冷凍樣品(低至10 ng)的總RNA或FFPE樣品(低至100 ng)的保存RNA。從(cong) 總RNA輸入到完整構建的文庫的整合工作流程具有很高的可重複性,可以在大約7小時內(nei) 完成。 NuGEN的依賴插入的AnyDeplete技術可有針對性地消除不需要的轉錄本,並顯著減少了源自人類rRNA(12S,16S,18S和28S基因)的測序數據,從(cong) 而更有效地利用了測序通量。該試劑盒均提供八個(ge) *的條形碼接頭,以使多重測序能夠進一步優(you) 化功效。
簡化的工作流程包括使用隨機和多聚(T)引物的混合物反轉錄生成雙鏈cDNA,雙鏈cDNA打斷,末端修複以生成平末端,接頭進行連接,通過核苷酸類似物靶向降解的鏈選擇,AnyDeplete技術介導的接頭裂解和PCR擴增以產(chan) 生終文庫。 整個(ge) 工作流程,包括片段化,都可在短短7個(ge) 小時內(nei) 完成,並生成可用於(yu) 在Illumina測序平台上進行單端或雙端測序的簇形成的DNA文庫。
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