磁性3D細胞培養(yang)
Greiner Bio-One的磁性3D細胞培養(yang) 技術的核心是使用NanoShuttle™-PL對細胞進行磁化。 細胞在磁力作用下聚合,以在體(ti) 外形成結構和生物學上典型的3D模型。 NanoShuttle™-PL由金、氧化鐵和聚L-賴氨酸組成。 這些納米顆粒(Ø~50nm)通過過夜孵育後以靜電力附著在細胞膜上,從(cong) 而磁化細胞。 孵育後,磁化細胞會(hui) 布滿深色的納米粒子。NanoShuttle™-PL具有生物相容性,對代謝、增殖和炎症應激均無影響。此外,它不會(hui) 幹擾下遊實驗,如熒光染色或Western blotting。
磁化的球狀體(ti) 在移液時可使用磁力將它們(men) 保持在靜止位置,使加液和吸液變得容易,從(cong) 而避免球狀體(ti) 的損失。 也可以使用諸如MagPen等磁性工具在容器之間轉移球狀體(ti) 。
磁性細胞培養(yang) 的優(you) 點:
模擬天然的組織環境
幾小時內(nei) 快速建立3D模型
無需特殊的培養(yang) 基
易於(yu) 操作/ 無樣品損失
可實現共培養(yang)
磁懸浮培養(yang)
磁懸浮是在體(ti) 外創建天然組織環境的簡便工具。通過過夜孵育將細胞用NanoShuttleTM-PL進行磁化並分配到具有細胞排斥表麵的培養(yang) 皿或培養(yang) 板中,在容器上方添加磁力使細胞懸浮。當懸浮過程中,細胞從(cong) 孔底脫離,磁力相當於(yu) 一種不可見的支架,可以迅速聚集細胞,並且促進細胞間的相互作用,誘導ECM合成。磁懸浮法已成功應用於(yu) 製備不同類型細胞的3D培養(yang) 物,包括細胞係、幹細胞和原代細胞。該技術的基本應用是在不同環境條件下進行3D細胞培養(yang) 。
磁性生物模印培養(yang) (Bioprinting)
與(yu) 磁懸浮培養(yang) 不同,磁性3D生物模印技術是將細胞與(yu) NanoShuttleTM-PL孵育過夜後,將微孔板放置在磁體(ti) 架上,從(cong) 而將磁化的細胞模印成球狀體(ti) 。每個(ge) 孔下方的磁鐵利用溫和的磁力來誘導細胞聚集並在每個(ge) 孔的底部模印成球狀體(ti) 。15分鍾至幾小時後,含有球狀體(ti) 的培養(yang) 板可以從(cong) 磁力架上移除並在無磁力的情況下長期培養(yang) 。 該係統能夠快速形成球狀體(ti) ,克服了其他平台的限製因素,並且球狀體(ti) 的尺寸具有可重複性,不限製於(yu) 細胞類型,同時還可以擴展至高通量(96和384孔)。利用磁
性3D生物模印技術,能模印出結構緊密並可繼續培養(yang) 生長的細胞球狀體(ti) ,可使用商品化的試劑盒持續檢測促進細胞活性和其他功能。3D模印方法以及商品化的標準試劑盒為(wei) 高通量化合物篩選提供了理想的組合。然後使用常用的生物學研究方法進行分析,例如免疫組化和免疫印跡.
環形磁性模印和成像係統
此外,3D生物打印已被證明可用於(yu) 開發新的細胞遷移實驗方法(環構建),這使得動力學成像可實現自動化,從(cong) 而實現高通量篩選。 這些實驗方法為(wei) 篩選化合物對細胞遷移的影響奠定了基礎。基於(yu) 磁性3D生物模印技術,經過NanoShuttle™-PL磁化的細胞被印刷成3D圓環。在生物模印後,由於(yu) 細胞的遷移和活性,這些圓環結構會(hui) 立即變得緊密並終閉合。使用緊湊型成像套件(帶有ipods *)可以拍攝圓環的閉合,該套件由免費的應用程序(實驗助手)編程,可以以特定間隔對整個(ge) 板進行成像,從(cong) 而不需要 再在顯微鏡下進行逐孔檢測。圓環的收縮通常在24小時內(nei) 完成,圖像可進行批量處理以便快速地 產(chan) 生毒理學數據。此外,由於(yu) 圓環沒有進行標簽標記,閉合後的環可用於(yu) 下遊的實驗(免疫組化,免疫印跡,基因組學等)。
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