生物製藥雜質概述：

在單克隆抗體(ti) 藥物的純化過程中，以蛋白A（Protein A）為(wei) 基礎的親(qin) 合層析是廣泛應用的純化方法之一，單克隆抗體(ti) 可以有效的在此步驟中得到純化。蛋白A 的最初來源是細菌（Staphylococcus aureus）細胞壁中的一個(ge) 蛋白質，研究表明蛋白A 可能對人體(ti) 有潛在的危害，它的生物學作用包括刺激人體(ti) 多種細胞素（IFNγ, TNFα, IL-1α,IL-1β, IL-2, IL-4）的釋放。由於(yu) 在蛋白A 親(qin) 合層析柱使用過程中會(hui) 有微量的蛋白A 從(cong) 層析柱上脫落下來，因此用精確靈敏的方法來確證單克隆抗體(ti) 藥物中蛋白A 的殘留處於(yu) 一個(ge) 較低的和穩定的水平是單克隆抗體(ti) 藥物的質量標準之一。
蛋白A (Protein A) 酶聯檢測試劑盒是用來定量分析生物藥物中蛋白A雜質的試劑盒。首先，用不同濃度的蛋白A標準蛋白製作一條標準曲線，然後再根據標準曲線來分析生物藥物中殘留蛋白A的含量。具體(ti) 方法為(wei) ：先將蛋白A標準蛋白或者待測樣品適當稀釋後加入已包被好抗蛋白A抗體(ti) 的96孔平板中。經過1.5小時的保溫，蛋白A與(yu) 已經固定在平板上的抗體(ti) 結合形成抗原－抗體(ti) 複合物。此複合物被隨後加入的生物素標記的抗蛋白A的抗體(ti) 結合並進一步形成更高級的複合物，反應45分鍾後洗去未結合的物質。再加入鏈黴親(qin) 合素-辣根過氧化物酶複合物（Streptavidin-HRP Conjugate），靜置30分鍾。因鏈黴親(qin) 合素可以與(yu) 任何帶生物素標記的抗體(ti) 相結合，從(cong) 而使鏈黴親(qin) 合素-辣根過氧化物酶複合物連接到平板上。接下來衝(chong) 洗掉未結合的物質，加入TMB底物。固相上的酶催化底物產(chan) 生顏色反應，待顏色反應一段時間後，終止反應。用酶標儀(yi) 在450 nm波長下測定其結果，此結果能間接地反應結合到平板上的蛋白A數量的多少。根據蛋白A標準曲線定量分析生物藥物中殘留蛋白A的含量。